试剂盒打开后，剩余试剂仍应按照上述保存条件保存。此外，将未使用的孔放回装有干燥剂包的铝箔袋中，并沿拉链密封的整个边缘重新密封。

有关套件的有效期，请参阅套件盒上的标签。在此日期之前，所有成分都是稳定的。

强烈建议在打开试剂盒后 1 个月内使用所有剩余试剂。

传统 ELISA 试剂盒：正确保存时，自生产日期起 12 个月。

阅读y-To-Use ELISA 试剂盒：自生产之日起，正确保存的情况下，保质期为 16 个月。

EASYStep ELISA 试剂盒：自生产之日起，正确保存的情况下，保质期为 6 个月。

EASYStep Pro ELISA 试剂盒：自生产之日起，正确保存的情况下，保质期为 6 个月。

请检查您的 ELISA 试剂盒包装上的具体有效期，或在此处联系我们，并提供您的订单批号。

请注意您感兴趣的试剂盒手册中推荐的样品类型。如果您有任何疑问或想知道我们是否可以定制适合您需求的试剂盒，请联系我们。

使用血清分离管，让样品在室温下凝结两小时或在 4℃ 下过夜，然后以约 1000×g 离心 20 分钟。立即测定新鲜制备的血清或将样品分装于-20℃或-80℃保存以备后用。避免重复冷冻/解冻循环。

使用 EDTA 或 hep 收集血浆阿林作为抗凝剂。收集后 30 分钟内将样品在 2 - 8℃ 下以 1000×g 离心 15 分钟。立即取出血浆并进行测定，或将样品分装于-20℃或-80℃保存以备后用。避免重复冷冻/解冻循环。

组织匀浆的制备将根据组织类型而有所不同。一般情况下，组织应在冰冷的 PBS（0.02mol/L，pH 7.0-7.2）中彻底冲洗，以去除多余的血液，并在匀浆前称重。将组织切碎成小块，并在冰上用玻璃均质器将其在 5-10 mL PBS 中均质化（也可以使用微型组织研磨机）。所得悬浮液应使用超声波细胞破碎仪进行超声处理或进行两次冻融循环以进一步破碎细胞膜。之后，匀浆应在 5000×g 下离心 5 分钟。去除上清液并立即进行测定或等分并保存在≤-20 ℃。

测定前必须裂解细胞

使用收集装置或等效物收集唾液并转移至离心管。将样品在-70°C 下冷冻 1 小时。在冰上解冻，并以 2,000 × g 离心 10 分钟。将澄清的上清液转移至干净的管中待用。立即进行测定或将样品等分储存于≤-20℃。避免重复冷冻/解冻循环。

无菌收集当天的第一次尿液（中流），直接收集到无菌容器中。离心去除颗粒物质，立即进行测定或等分并储存在 ≤-20oC 下。避免重复冻融循环。

在 2 - 8oC 下以 10,000 × g 离心样品 15 分钟。收集水相并离心两次以上，总共 3 个循环。立即进行测定或将样品分装在 -20oC 或 -80oC 下保存以供以后使用。避免重复冷冻/解冻循环。

以 1000 x g 离心样品 20 分钟。立即去除颗粒并进行测定，或将样品分装在 -20oC 或 -80oC 下保存。避免重复冻融循环。

用稀释缓冲液重新配制标准品，室温放置10分钟，轻轻摇匀（不要起泡）。标准储备液中标准品的浓度请参阅说明书。准备 7 个装有 0.5mL 标准稀释液的试管，并使用稀释后的标准品制备双倍稀释系列。在下次转移之前彻底混合每个管。

传统 ELISA 试剂盒：使用前短暂旋转或离心储备的检测 A 和检测 B 溶液。用稀释缓冲液 (1:100) 稀释至工作浓度。

即用型 ELISA 试剂盒：检测溶液 A 和 B 已达到正确浓度，无需进一步稀释

用580mL去离子水或蒸馏水稀释20mL洗涤液浓缩液(30×)，制备600mL洗涤液(1×)。

用消毒吸头吸出所需剂量的溶液。不要将残留溶液倒回小瓶中。

有关推荐的样品类型，请查阅具体的手册。您感兴趣的试剂盒。

我们通常无法对客户样品的样品稀释提出任何建议。如果您不确定预期的样品浓度，我们建议您在开始实际实验之前进行初步稀释实验，以确定最适合您的各个样品的浓度和稀释度。我们始终建议确保您的样品处于试剂盒的检测范围内，以获得最佳结果。

该试剂盒中提供的微量滴定板已预涂有针对目标抗原的特异性抗体。然后将标准品或样品添加到适当的微量滴定板孔中，其中含有针对目标抗原的生物素缀合抗体制剂。接下来，将与辣根过氧化物酶 (HRP) 缀合的亲和素添加到每个微孔板孔中并孵育。 TMB 替补之后如果添加了目标溶液，则只有含有目标抗原、生物素缀合抗体和酶缀合亲和素的孔才会出现颜色变化。通过添加硫酸溶液终止酶-底物反应，并在 450nm ± 10nm 的波长下通过分光光度法测量颜色变化。然后通过比较 O.D. 来确定样品中目标抗原的浓度。样品到标准曲线。

该测定采用竞争性抑制酶免疫测定技术。针对目标抗原的单克隆抗体已预先包被到微孔板上。生物素标记的靶抗原和未标记的靶抗原（标准品或样品）与预包被的靶抗原特异性抗体之间发生竞争性抑制反应。温育后，未结合的缀合物被洗掉。接下来，将与辣根过氧化物酶 (HRP) 缀合的亲和素添加到 e每个微孔板孔并孵育。结合的 HRP 缀合物的量与样品中靶抗原的浓度成反比。添加底物溶液后，显色强度与样品中目标抗原的浓度成反比。

对每个标准品、对照品和样品的重复读数进行平均，然后减去平均零标准光密度。通过绘制平均 O.D 来构建标准曲线。和每个标准的浓度，并通过图表上的点绘制最佳拟合曲线，或在双对数方格纸上创建标准曲线，y 轴为目标抗原浓度，x 轴为吸光度。还建议使用绘图软件（例如 curve Expert 1.30）。如果样品已被稀释，则必须将标准曲线中读取的浓度乘以稀释系数。

此检测采用竞争性抑制酶免疫检测技术，因此样品中靶抗原浓度与检测信号强度呈负相关。对每个标准品、对照品和样品的重复读数进行平均。在双对数或半对数方格纸上创建标准曲线，y 轴为目标抗原浓度的对数，x 轴为吸光度。通过标准点画出最佳拟合直线，也可以通过回归分析来确定。还建议使用绘图软件（例如 curve Expert 1.30）。如果样品已被稀释，则必须将标准曲线中读取的浓度乘以稀释因子。

检测的灵敏度或检测下限 (LLD) 定义为可与零区分的最低蛋白质浓度。通过将二十零秒的平均光密度值加上两个标准差来确定标准重复并计算相应的浓度。请参阅您感兴趣的试剂盒手册以获取更多信息。

为了使计算更容易，请绘制 O.D.标准品（X 轴）相对于已知标准品浓度（Y 轴）的值，尽管浓度是自变量，并且 O.D.值是因变量。外径标准曲线的值可能会因检测性能条件（例如操作员、移液技术、清洗技术或温度影响）而有所不同。建议绘制数据对数以建立每次测试的标准曲线。请参阅试剂盒中包含的手册，了解典型的标准曲线。

确定我们所有试剂盒精度的一般方法如下所述。可根据要求提供针对个人和批次试剂盒的规格。

我们的 ELISA 试剂盒的稳定性取决于丢失率的活动。在适当的储存条件下，我们的试剂盒在有效期内的损失率通常低于5%。

为了尽量减少外界对我们试剂盒性能的影响，应始终控制操作程序和实验室条件。要特别注意的因素包括：室温、空气湿度和培养箱温度。还强烈建议整个测定从开始到结束由同一实验人员进行。

与本试剂盒一起使用的终止液是酸性溶液。使用此试剂时，请佩戴眼睛、手、面部和衣服防护装置。

我们所有的 ELISA 试剂盒在发货前都经过严格的质量控制流程和彻底的验证测试。我们所有产品的分析证书均可根据要求提供。请在此处联系我们，并提供您感兴趣的目录号或订单的批号，以申请 COA。

可根据要求提供我们所有产品的材料安全数据表。请在此处联系我们索取 MSDS。

我们很乐意接受在线、电子邮件或电话下的订单。我们一般可以接受通过采购订单、电汇或信用卡（VISA、万事达卡、美国运通卡）付款。交货时间可能因订单而异，请查询具体信息。

我们可以将我们的产品运送到全球大多数国家/地区。我们很高兴提供有竞争力的运费，或使用客户现有的运输帐户。

有关我们的退款和退货政策的更多信息，请参见此处。

单克隆、多克隆、流式细胞术和二抗

单克隆：单克隆抗体特异性识别抗原上的单个表位，从而提供抗原与多克隆抗体相比，交叉反应性低，特异性高，批间稳定性优异。

多克隆抗体：多克隆抗体是生物体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白，由异源抗原的免疫反应产生。多克隆抗体可用于识别多个抗原表位，引起沉淀反应，需要很少的准备时间并且具有成本效益。

流式细胞术：流式细胞术抗体是荧光单克隆抗体标记，可用于流式细胞术研究

二抗：二抗与一抗结合（它们是\"抗抗体”）。二抗通过与一抗结合，放大信号并提高检测灵敏度来间接检测目标蛋白。

装有 Reddot Biotech 抗体溶液和数据表的小瓶

请注意，我们网站上提供的所有数据表仅供参考，可能会不定期更新。我们建议您阅读并参考实验订单中包含的数据表。

在移液内容物之前离心小瓶以确保完全回收

对于 FCM 抗体：以浓缩溶液形式保存。储存于2~8℃，避免长时间暴露在光线下。请勿冷冻。

一般抗体：-20℃保存。避免冷冻/解冻循环。

在正确储存的情况下，所有抗体的保质期为自生产之日起 12 个月。请检查抗体包装上的具体有效期，或通过订单发票或批号联系我们。

酶联免疫吸附测定 (ELISA)

蛋白质印迹 (WB)

免疫组织化学 (IHC)

免疫荧光 (IF)

标记

流式细胞术 (FCT)

我们不能保证抗体产品在未经验证的物种中表现良好。即使序列比对很高，也可能有多种其他因素影响抗体的反应。

如果抗体没有指定稀释度，（l被列为\"取决于测定”）我们建议在开始真正的实验之前进行初步实验以确定最佳稀释比例。如果您需要帮助，请随时与我们联系。

抗原修复的最佳方法通常会因抗体而异，并且可能需要个体优化。如果您需要帮助，请随时与我们联系。

我们的所有抗体都经过严格验证，以确保极高的质量和纯度。我们的抗体针对多种物种，可用于多种不同的应用。有关产品的具体信息，请访问各个产品页面，或在此处联系我们。

我们很乐意接受通过在线、电子邮件或电话下达的订单。我们通常可以通过采购订单、电汇或信用卡（VISA、万事达卡、美国运通卡）接受付款。交货时间可能因订单而异，请询问很想了解具体信息。

我们可以将我们的产品运送到全球大多数国家/地区。我们很高兴提供有竞争力的运费，或使用客户现有的运输帐户。

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Reddot Biotech 目前提供以下分子生物学产品：

对于 DNA 和 RNA 分离，除了基于试剂的试剂盒和基于柱的试剂盒之外，我们还提供双试剂 + 柱试剂盒。

对于在任何下游实验中使用试剂分离程序后可能需要进一步纯化的样品，建议使用双试剂 + 柱试剂盒。

在室温 (18-25oC) 下储存所有组件。

对于所有其他产品：

请参阅标签了解建议的储存条件。

对于所有隔离套件：

按照建议储存，套件可稳定保存 18 个月。

对于所有其他产品：

请参阅标签了解建议的储存条件和保质期生命。

可根据要求提供我们所有产品的材料安全数据表。请在此联系我们索取 MSDS。

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